在日化產(chǎn)品供人使用前，有必要對其進行風險評估，以便獲得準確信息，確保消費者的安全。可利用體外重組皮膚模型對日化產(chǎn)品進行安全性評估，主要是針對日化產(chǎn)品成分可能造成的毒性，包括刺激性、腐蝕性、光毒性和遺傳毒性等。

日化產(chǎn)品安全評估-毒理試驗體外評估方法

日化產(chǎn)品安全評估內(nèi)容

1.日化產(chǎn)品刺激性和腐蝕性試驗

皮膚刺激是指皮膚接觸試驗材料后，產(chǎn)生可逆的組織損傷，而皮膚腐蝕是指皮膚在接觸試驗材料后，產(chǎn)生不可逆的組織損傷，通常通過檢測細胞活性的變化來定義有無刺激性和有無腐蝕性，根據(jù)歐洲替代方法驗證中心(ECVAM)和經(jīng)濟與合作發(fā)展組織(OECD)給出的指南OECDTG439、OECD TG43124.以下內(nèi)容來定義刺激性和腐蝕性。

日化產(chǎn)品刺激性：

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸15 min后孵育42h，細胞活力≤50%，為刺激性

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸15min后孵育42h，細胞活力>50%且IL-1x釋放量>60pg/mL，為刺激性

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸15 min后孵育42h，細胞活力>50%且IL-1α釋放量≤60 pg/mL，為非刺激性

日化產(chǎn)品腐蝕性：

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸3min，細胞活力<50%，為腐蝕性

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸3 min，細胞活力≥50%，但1h后，細胞活力<15%，為腐蝕性

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸3min，細胞活力≥50%，但1h后，細胞活力≥15%，為非腐蝕性

為了使多種體外重組皮膚模型適用于皮膚腐蝕測試，在OECD給出的指南OECDTG431中，規(guī)定了模型在常規(guī)用于皮膚腐蝕測試之前必須滿足的條件，同時，該指南要求模型能夠正確評估丙烯酸、氫氧化鉀、苯乙基溴等12種參考化學物質(zhì)的腐蝕性。

通過檢測經(jīng)受試物處理之后重組皮膚模型的組織活力和炎癥因子的表達情況，評估相應的刺激性和腐蝕性級別。

2.日化產(chǎn)品成分的光毒性試驗

光毒性反應是一種光誘導的急性反應，當光活性化學物質(zhì)被太陽光激活并對皮膚具有毒性時，就會發(fā)生光毒性反應，對皮膚造成損害。已知多種有機化學物質(zhì)會引起光毒性反應，是因為它們的分子結(jié)構(gòu)中普遍含有吸收太陽光中紫外線的苯環(huán)或雜環(huán)。紫外線分為UVC(200~280nm)、UVB(290~320nm)和UVA(320~400nm)，并且皮膚長期暴露在紫外線下，造成機體產(chǎn)生DNA損傷、氧化應激和炎癥反應等一系列不良癥狀，從而導致皮膚癌發(fā)病率的增加。

國際多中心體外細胞毒性評估和ECVAM建議使用小鼠胚胎成纖維細胞3T3的中性紅攝取試驗(3T3NRU)分析光毒性水平。

3.日化產(chǎn)品成分的遺傳毒性試驗

遺傳毒性是一個廣義術語，指環(huán)境中的理化因素對生物體遺傳物質(zhì)造成損傷，從而給機體帶來毒性反應。遺傳毒性測試通常通過評估點突變和染色體損傷來進行，而微核是細胞受到染色體損傷時出現(xiàn)在細胞質(zhì)中的獨立于主核的微小核，它可能來自于細胞分裂后期不能與其他染色體一起遷移的柒色體片段或整條染色體，所以微核試驗被認為是通過評估染色體損傷進而評估遺傳毒性的一種標準方法。

微核試驗作為一種體內(nèi)評估染色體損傷的可靠方法不僅用于危險識別還用于風險評估，但之前常在哺乳動物上進行，有悖動物福利和3R原則，利用重組皮膚模型進行體外微核試驗，有效地避開了這種問題，并解決了假陽性率過高的缺點，而且此類模型可以更好的反應體內(nèi)的復雜情況，比如吸收、代謝、組織特異性等，但還需大量實驗驗證可靠性，盡早成為廣泛有效的遺傳毒性體外替代方法

日化產(chǎn)品安全評估-毒理試驗體外評估方法